使用说明书
【产品名称】
Fast DNA Library Plus Prep Kit for MGI
【货号/规格】
KM004-A(24 rxns);;;;;KM004-B(96 rxns);;;;;试用装(6 rxns)
【产品简述】
本试剂盒针对 MGI 高通量测序平台,,,,,提供了一管式便捷、通用的 DNA 文库构建计划,,,,,将片断化、最后补平和最后加 A 连系到一个办法,,,,,大大缩短了建库的时间、镌汰了繁琐办法造成的误差,,,,,片断化和最后修复后的产品可直接举行讨论毗连,,,,,不需特殊纯化,,,,,后续操作和#KM001 Fast DNA Library Prep Kit for MGI操作相同。。。完整的文库定量可将文库稀释至合适浓度,,,,,用双链 DNA 荧光染料要领(如Thermo Qubit Flex Fluorometer)或 qPCR 绝对定量要领。。。
【样本类型】
表 1 常用DNA推荐投入量
应用 | 样本类型 | 推荐投入量 |
全基因组测序 | 高质量重大基因组 | 50ng-1μg |
全外显子靶向捕获测序 | 高质量重大基因组 | 10ng-1μg |
全基因组靶向捕获测序 | FFPE DNA | ≥50ng |
全基因组测序 | 微生物基因组 | 1ng-1μg |
推荐使用 TE 或超纯水消融 DNA 样品,,,,,如样品中含有 EDTA,,,,,则需磁珠纯化或加入一定体积的 Neutralization Buffer 中和。。。
【贮存条件及有用期】
所有试剂均应生涯于-20℃,,,,,Ligation Buffer 在低温下会有晶体析出,,,,,属正常征象,,,,, 应平衡至室温后使用,,,,,产品有用期为 12 个月。。。
【组成因素】
组分 | 24 rxns | 96 rxns |
FEP Buffer | 120 μl | 480 μl |
FEP Enzyme Mix | 240 μl | 2×480 μl |
Fast DNA Ligase | 120 μl | 2×240 μl |
Fast Ligation Buffer | 600 μl | 4×600 μl |
2× HIFI Library PCR Master Mix | 600 μl | 4×600 μl |
Primer Mix for MGI * | 120 μl | 480 μl |
Neutralization Buffer | 120 μl | 480 μl |
*FEP Buffer 为片断化、最后修复的反应 buffer,,,,,FEP Enzyme Mix 为片断化、最后修复相关酶混淆物。。。
*若有多个样本,,,,,则推荐使用#KM002 和#KM003 讨论引物组合,,,,,本试剂盒提供一套引物,,,,,引物序列如下:
5’-TGTGAGCCAAGGAGTTG-3’
5’-GAACGACATGGCTACGA-3’
备注:分选磁珠推荐使用#NC1011 GDSPure DNA Selection Magbeads 或 AMPure XP beads。。。