λDNA/Hind Ⅲ DNA Marker

产品名称

λDNA/HindⅢ

货号规格

M1201/60次，，，，，M1202/60次×3

产品说明

λDNA/HindⅢ是包括8条双链线状DNA片断的DNA分子量标准（DNA Marker/ DNA Ladder），，，，，这些片断是由λDNA经限制性内切酶HindⅢ完全酶切并纯化的产品。。

条带组成（bp）

125、564、2,027、2,322、4,361、6,557、9,416、23,130

建议上样量

3-5 ?l/次。？？善局ど涎拙尴秆≡窈鲜噬涎。。

λDNA/HindⅢ已预混上样缓冲液，，，，，可直接举行电泳剖析。。在电泳前举行热处置惩罚（60℃, 5分钟，，，，，冰上骤冷3分钟），，，，，能使电泳图更为清晰。。

建议电泳条件

8 cm  0.7%琼脂糖凝胶，，，，，

1×TAE，，，，，7 V/cm，，，，，45 min。。

生涯条件

-20℃生涯。。

●  关于非变性凝胶电泳，，，，，Marker是否需要DNA变性?

答：本公司Marker产品中只有Lambda DNA Marker为质粒酶切产品，，，，，在电泳上样前如加热处置惩罚可获得最佳效果，，，，，其余产品均不需点样前加热处置惩罚；；；另外电压太高也会使凝胶过热和DNA变性造成带型异常。。

●  当DNA停留在凝胶点样孔处时该怎么办？？

答：检查胶浓度是否在适合疏散DNA片断的规模，，，，，点样孔是否高质，，，，，确保电泳的正负极准确，，，，，检查电泳缓冲液是否具有缓冲能力，，，，，确保DNA样品的纯度，，，，，如举行PCR产品的纯化，，，，，确保样本中没有或只保存少量的DNA连系卵白或其他可与DNA连系的化合物。。

●  为什么DNA条带不睬想？？

答：影响电泳条带的因素许多，，，，，如凝胶种类或浓度不对适，，，，，质量不佳；；；上样量过多或过少；；；样本的纯度不高，，，，，盐浓度过高；；；电泳缓冲液缓冲能力缺乏，，，，，有核酸酶污染；；；电泳条件不准确；；；染色不充分或不匀称；；；跑胶后没有实时照相。。

●  为什么定量数据不准确以及怎样准确定量样品？？

答：样品和Marker的上样条件差别，，，，，参考条带不准确，，，，，凝胶的不匀称染色或配景过高都会滋扰凝胶定量效果。。样品DNA和Marker DNA在电泳前选用相同的上样染料处置惩罚，，，，，调解样品浓度，，，，，使其在凝胶中的含量与分子量最靠近标准DNA条带，，，，，样品DNA和Marker的上样体积只管靠近，，，，，样品用1×上样缓冲液稀释；；；定量时以分子量最靠近的标准条带为参照物，，，，，剖析样品条带的含量；；；使用凝胶图像剖析软件，，，，，如SensiAnsys可对DNA举行准确定量，，，，，比目测条带要领更准确。。

●  为什么在变性聚丙烯酰胺/尿素凝胶里电泳时会泛起杂带？？

答：一样平常来说，，，，，双链DNA Marker不推荐用于变性电泳，，，，，不然会爆发非正常带型，，，，，即泛起所谓的杂带。。这种泛起异型带的征象，，，，，在100 bp以下的条带极易爆发。。当您的实验不可阻止的要使用变性聚丙烯酰胺/尿素凝胶举行电泳时，，，，，我们建议，，，，，将样品和Marker选用同样的变性上样缓冲液举行变性处置惩罚后上样，，，，，以消除二级结构。。