20bp Ladder DNA Marker

产品名称

20bp Ladder

货号规格

M1021/60次，，，，，M1022/60次×3

产品说明

20bp Ladder是由13 条双链线状DNA片断混淆而成的DNA分子量标准（DNA Marker/ DNA Ladder），，，，，适用于确定20 bp至300 bp的线性双链DNA片断大。。。。。，，，，指示带为100 bp和200 bp，，，，，便于电泳后视察。。。。。每条带都通过严酷的物理定量可用于测定目的片断的巨细和含量。。。。。

产品浓度为128 ng/?l。。。。。

条带组成（bp）

60、80、100、120、140、160、180、200、220、240、260、280、300

建议上样量

3-5 ?l/次。。。。
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20bp ladder已预混上样缓冲液，，，，，可直接举行电泳剖析。。。。。

建议电泳条件

8 cm  5 %琼脂糖凝胶，，，，，

0.5×TBE，，，，，5 V/cm，，，，，1 h。。。。。

20 cm  10 %聚丙烯酰胺凝胶电泳，，，，，

1×TBE，，，，，8 V/cm，，，，，3 h。。。。。

生涯条件

常温生涯3个月，，，，，恒久生涯请置于-20℃。。。。。

各条带含量

指示带     100 ng/5?l

非指示带   40 ng/5?l

●  关于非变性凝胶电泳，，，，，Marker是否需要DNA变性?

答：本公司Marker产品中只有Lambda DNA Marker为质粒酶切产品，，，，，在电泳上样前如加热处置惩罚可获得最佳效果，，，，，其余产品均不需点样前加热处置惩罚；；；；；另外电压太高也会使凝胶过热和DNA变性造成带型异常。。。。。

●  当DNA停留在凝胶点样孔处时该怎么办
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答：检查胶浓度是否在适合疏散DNA片断的规模，，，，，点样孔是否高质，，，，，确保电泳的正负极准确，，，，，检查电泳缓冲液是否具有缓冲能力，，，，，确保DNA样品的纯度，，，，，如举行PCR产品的纯化，，，，，确保样本中没有或只保存少量的DNA连系卵白或其他可与DNA连系的化合物。。。。。

●  为什么DNA条带不睬想
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答：影响电泳条带的因素许多，，，，，如凝胶种类或浓度不对适，，，，，质量不佳；；；；；上样量过多或过少；；；；；样本的纯度不高，，，，，盐浓度过高；；；；；电泳缓冲液缓冲能力缺乏，，，，，有核酸酶污染；；；；；电泳条件不准确；；；；；染色不充分或不匀称；；；；；跑胶后没有实时照相。。。。。

●  为什么定量数据不准确以及怎样准确定量样品
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答：样品和Marker的上样条件差别，，，，，参考条带不准确，，，，，凝胶的不匀称染色或配景过高都会滋扰凝胶定量效果。。。。。样品DNA和Marker DNA在电泳前选用相同的上样染料处置惩罚，，，，，调解样品浓度，，，，，使其在凝胶中的含量与分子量最靠近标准DNA条带，，，，，样品DNA和Marker的上样体积只管靠近，，，，，样品用1×上样缓冲液稀释；；；；；定量时以分子量最靠近的标准条带为参照物，，，，，剖析样品条带的含量；；；；；使用凝胶图像剖析软件，，，，，如SensiAnsys可对DNA举行准确定量，，，，，比目测条带要领更准确。。。。。

●  为什么在变性聚丙烯酰胺/尿素凝胶里电泳时会泛起杂带
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答：一样平常来说，，，，，双链DNA Marker不推荐用于变性电泳，，，，，不然会爆发非正常带型，，，，，即泛起所谓的杂带。。。。。这种泛起异型带的征象，，，，，在100 bp以下的条带极易爆发。。。。。当您的实验不可阻止的要使用变性聚丙烯酰胺/尿素凝胶举行电泳时，，，，，我们建议，，，，，将样品和Marker选用同样的变性上样缓冲液举行变性处置惩罚后上样，，，，，以消除二级结构。。。。。